Pepsin

Bách khoa toàn thư mở Wikipedia
Jump to navigation Jump to search
pepsin A
1PSO.png
Pepsin trong phức tạp với pepstatin.[1]
Mã định danh(ID)
Mã EC 3.4.23.1
Mã CAS 9001-75-6
Các dữ liệu thông tin
IntEnz IntEnz view
BRENDA BRENDA entry
ExPASy NiceZyme view
KEGG KEGG entry
MetaCyc chu trình chuyển hóa
PRIAM profile
Các cấu trúc PDB RCSB PDB PDBe PDBsum
Bản thể gen AmiGO / EGO
pepsin B
Mã định danh(ID)
Mã EC 3.4.23.2
Mã CAS 9025-48-3
Các dữ liệu thông tin
IntEnz IntEnz view
BRENDA BRENDA entry
ExPASy NiceZyme view
KEGG KEGG entry
MetaCyc chu trình chuyển hóa
PRIAM profile
Các cấu trúc PDB RCSB PDB PDBe PDBsum
pepsin C (gastricsin)
Mã định danh(ID)
Mã EC 3.4.23.3
Mã CAS 9012-71-9
Các dữ liệu thông tin
IntEnz IntEnz view
BRENDA BRENDA entry
ExPASy NiceZyme view
KEGG KEGG entry
MetaCyc chu trình chuyển hóa
PRIAM profile
Các cấu trúc PDB RCSB PDB PDBe PDBsum

Pepsin là một enzyme phân hủy trực tiếp protein thành các peptide nhỏ hơn (còn gọi là protease). Pepsin được sản xuất trong dạ dày và là một trong những enzym tiêu hóa chính trong hệ thống tiêu hóa của con người và nhiều loài động vật khác, có vai trò quan trọng tiêu hóa các protein của thức ăn. Pepsin là một trong ba protease chính của hệ thống tiêu hóa con người, hai chất còn lại là chymotrypsintrypsin. Trong quá trình tiêu hóa, các enzyme này có nhiệm vụ cắt đứt liên kết giữa các axit amin, chúng phá vỡ các cấu trúc protein thức ăn thành các phần nhỏ hơn, tức là các peptide và axit amin, để có thể dễ dàng hấp thụ dinh dưỡng bởi ruột non. Pepsin là enzym hiệu quả nhất trong việc bóc liên kết peptide kỵ nước với axit amin thơm như phenylalanine, tryptophantyrosine.[2]

Pepsin của proenzyme, pepsinogen, được thoát ra từ các tế bào chính ở thành dạ dày, và khi hòa với axit hydrochloric trong dạ dày, pepsinogen kích hoạt để trở thành pepsin. Pepsin là một protease aspartic, sử dụng một aspartate xúc tác trong hoạt điểm (active site) của nó.[3]

Lịch sử[sửa | sửa mã nguồn]

Pepsin là một trong những enzyme được phát hiện đầu tiên. Nó đã được phát hiện bởi nhà tế bào học, mô học, sinh lý học người Đức Theodor Schwann vào năm 1836. Ông đặt tên enzym này theo tiếng Hy Lạp của từ πέψις pepsis, có nghĩa là "tiêu hóa" (chữ πέπτειν peptein từ chữ "digest").[4][5][6][7] Trong khoảng thời gian này, các nhà khoa học bắt đầu khám phá ra nhiều hợp chất sinh hóa mới có một ý nghĩa quan trọng trong quá trình sinh học, và pepsin là một trong số đó. Một chất có tính axit chuyển đổi thức ăn dạng nitơ dựa vào vật liệu hòa tan trong nước được xác định là pepsin.[8].

Năm 1928, pepsin đã trở thành một trong những enzyme đầu tiên được kết tinh protein khi John H. Northrop tinh nó sử dụng để lọc máu,lọc nước và làm mát[9]

Tiền thân[sửa | sửa mã nguồn]

Tế bào chính của dạ dày tạo pepsinogen, lipaserenin.

Pepsin được biểu hiện như một zymogen gọi là pepsinogen, có cấu trúc chính với 44 axit amin được bổ sung vào. Trong dạ dày,các tế chính tạo ra các pepsinogen. Zymogen này được kích hoạt bằng axit hydrochloric (HCl), được thoát ra từ các tế bào thành trong niêm mạc dạ dày. Các hormonegastrin và dây thần kinh phế vị kích thích pepsinogen và HCl tiết ta từ dạ dày khi thức ăn được tiêu hóa. Axit clohiđric làm cho môi trường dạ dày có tính axit, cho phép pepsinogen được kích hoạt và tách riêng trong một chất xúc tác riêng do đó tạo thành các pepsin hoạt động. Phân cắt pepsin 44 axit amin từ pepsinogen tạo pepsin. Như vậy pepsinogen được coi là tiền thân của Pepsin.

Hoạt động và ổn định[sửa | sửa mã nguồn]

Pepsin hoạt động ổn định nhất trong môi trường axit giữa 37 °C và 42 °C.[10][11] Theo đó, hoạt điểm chính được tổng hợp và hoạt động trong dạ dày (pH 1.5 to 2). Pepsin sẽ tiêu hóa lên đến 20% nhóm amide bằng cách tách ưu tiên N-terminal[12]:96 của các axit amin thơm như phenylalanine, tryptophantyrosine.[12]:675 Pepsin thể hiện sự phân cắt ưu tiên đối với chất kỵ nước, vòng thơm, ở những vị trí P1 và P1'. Tăng nhạy cảm quá trình thủy phân nếu có một axit amin chứa lưu huỳnh gần với bó peptide, trong đó có một loại axit amin thơm. Phân cắt pepsin Phe1Val, Gln4His, Glu13Ala, Ala14Leu, Leu15Tyr, Tyr16Leu, Gly23Phe, Phe24. Pepsin hoạt động tối đa ở pH 2.0 và không hoạt động ở pH 6.5 và trở lên, tuy nhiên pepsin là không hoàn toàn biến tính hoặc không thể phục hồi bất hoạt cho đến khi pH 8,0.[13] Do đó, pepsin trong dung dịch lên đến pH 8,0 có thể được kích hoạt lại khi tái axit hóa. Sự ổn định của pepsin ở pH cao có ý nghĩa quan trọng về bệnh Trào ngược hầu-thanh quản. Pepsin vẫn ở thanh quản sau sự kiện trào ngược dạ dày.[14][15] PH trung bình của vùng hầu thanh quản (pH = 6,8) pepsin sẽ không hoạt động nhưng có thể được kích hoạt lại sau khi các sự kiện axit trào ngược sau đó gây thiệt hại cho các xung quanh.

Trào ngược hầu thanh quản[sửa | sửa mã nguồn]

Pepsin là một trong những nguyên nhân chính của tổn thương niêm mạc trong trào ngược hầu thanh quản.[16][17] Pepsin vẫn ở thanh quản (pH 6.8) sau một sự kiện trào ngược dạ dày.[14][15] Trong khi các enzyme hoạt động trong môi trường này, pepsin sẽ vẫn ổn định và có thể được kích hoạt lại sau khi các sự kiện trào ngược axit tiếp theo.[13] Tiếp xúc của niêm mạc thanh quản pepsin để enzym hoạt động, nhưng không phải không thể phục hồi bất hoạt pepsin hoặc axit, kết quả là giảm biểu hiện của protein bảo vệ và do đó làm tăng sự nhạy cảm của thanh quản gây tổn thương.[13][14][15]

Pepsin cũng có thể gây tổn thương niêm mạc dạ dày trong trào ngược dạ dày yếu tính axit hoặc không sinh axit. Trào ngược yếu hoặc không axit có tương quan với các triệu chứng trào ngược và tổn thương niêm mạc.[18][19][20][21] Trong điều kiện không sinh axit (pH trung tính), pepsin được nội địa bởi các tế bào đường hô hấp trên như thanh quản và hầu dưới bằng một quá trình gọi là receptor-mediated endocytosis (nhập bào được làm dễ nhờ receptor) .[22] Các thụ thể mà pepsin được endocytosed hiện vẫn chưa biết. Sau khi hấp thu của tế bào, pepsin được lưu trữ trong các túi nội bào của pH thấp mà tại đó hoạt động enzym của nó sẽ được phục hồi. Pepsin được giữ lại trong tế bào cho đến 24 giờ.[23] tiếp xúc như vậy để pepsin ở pH trung tính và endoyctosis của pepsin gây ra những thay đổi trong biểu hiện gen liên quan với viêm, làm nền tảng cho các dấu hiệu và triệu chứng của trào ngược,[24] và sự tiến triển của khối u.[25] Và các nghiên cứu khác [26] liên quan đến pepsin trong ung thư do trào ngược dạ dày.

Pepsin trong mẫu vật đường thở được coi là một dấu hiệu nhạy cảm và cụ thể cho trào ngược hầu thanh quản.[27][28] Nghiên cứu phát triển các công cụ điều trị và chẩn đoán pepsin nhằm mục tiêu mới cho trào ngược dạ dày đang tiếp tục. Một pepsin không xâm lấn nhanh chóng chẩn đoán gọi Peptest bây giờ đã có trong đó xác định sự hiện diện của pepsin trong các mẫu nước bọt.[29]

Bảo quản[sửa | sửa mã nguồn]

Pepsins nên được bảo quản ở nhiệt độ rất thấp (từ -80 °C và -20 °C) để ngăn chặn autolysis (tự tiêu hóa).

Các chất ức chế[sửa | sửa mã nguồn]

Pepsin có thể bị ức chế bởi độ pH cao (xem "hoạt động" và "ổn định" ở trên) hoặc bởi các hợp chất ức chế. Pepstatin là một hợp chất có phân tử lượng thấp và chất ức chế mạnh cụ thể cho các protease acid với một Ki khoảng 10−10M cho pepsin. Dư lượng statyl của pepstatin được cho là chịu trách nhiệm cho sự ức chế pepstatin của pepsin; statine là một analog tiềm năng của trạng thái chuyển tiếp cho xúc tác bởi pepsin và protease axit khác. Pepstatin không đồng hóa trị ràng buộc pepsin và ức chế pepsin bởi pepstatin là do có thể phá hủy.[30] 1-bis (diazoacetyl) -2-penylethane nghịch bất hoạt pepsin ở pH 5, một phản ứng mà được tăng tốc bởi sự hiện diện của Cu (II).[31]

Pepsin cũng trải qua sự ức chế phản hồi; một sản phẩm của quá trình tiêu hóa protein làm chậm phản ứng bằng cách ức chế pepsin.[32][33]

Sucralfate cũng ức chế hoạt động pepsin.

Ứng dụng[sửa | sửa mã nguồn]

Pepsin thương mại được tách từ lớp tuyến của dạ dày heo. Nó là một thành phần của rennet được sử dụng để đông sữa trong khi sản xuất pho mát. Pepsin được sử dụng cho một loạt các ứng dụng trong sản xuất thực phẩm: để biến đổi và cung cấp chất lượng whipping với protein đậu nành và gelatin,[34], biến đổi các protein thực vật để sử dụng trong các mặt hàng ăn nhẹ không làm từ bơ, để làm ngũ cốc nấu chín trước khi vào ngũ cốc nóng tức thời,[35] và để chuẩn bị thủy phân động vật và protein thực vật để sử dụng trong hương liệu thực phẩm và đồ uống. Nó được sử dụng trong ngành công nghiệp da để loại bỏ lông và mô còn sót lại từ da và trong việc thu hồi bạc từ phim ảnh loại bỏ bởi tiêu hóa các lớp gelatin chứa bạc.[36] Pepsin là lịch sử một chất phụ gia của Beemans gum thương hiệu kẹo cao su của Tiến sĩ Edward E. Beeman. Nó cũng cho biết tên để Pepsi-Cola, ban đầu được xây dựng với pepsin và hạt côla.

Pepsin thường được sử dụng trong việc chuẩn bị của F(ab ') 2 mảnh vỡ từ kháng thể. Trong một số thử nghiệm, nó là thích hợp để chỉ sử dụng (Fab) phần kháng nguyên-ràng buộc của kháng thể. Đối với các ứng dụng này, các kháng thể có thể được các enzyme tiêu hóa để sản xuất hoặc một Fab hoặc F(ab') 2 mảnh của kháng thể. Để sản xuất một F(ab') 2 mảnh, IgG được tiêu hóa với pepsin, phân cắt các chuỗi nặng gần khu vực bản lề. Một hoặc nhiều hơn các nhóm disulfide mà tham gia vào chuỗi nặng trong khu vực bản lề được bảo tồn, do đó, hai vùng Fab của kháng thể vẫn tham gia với nhau, cho ra một phân tử hóa trị II (chứa hai vị trí gắn kết kháng thể), do đó việc chỉ định F (ab') 2. Các chuỗi ánh sáng vẫn còn nguyên vẹn và gắn liền với chuỗi nặng. Các Fc đoạn được tiêu hóa thành các peptide nhỏ. Mảnh Fab được tạo ra bởi sự phân tách của IgG với papain thay vì pepsin. Sẽ tách papain IgG trên khu vực bản lề có chứa các liên kết disulfide mà tham gia vào chuỗi nặng, nhưng bên dưới hoạt điểm của các cầu nối disulfide giữa các chuỗi nhẹ và chuỗi nặng. Điều này tạo ra hai đơn trị riêng biệt (có chứa một vị trí bám kháng thể đơn) mảnh Fab và Fc đoạn còn nguyên vẹn. Các mảnh vỡ có thể được tinh chế bằng lọc gel, trao đổi ion, hoặc sắc ký ái lực.[37]

Fab và F (ab ') 2 mảnh kháng thể được sử dụng trong các hệ thống khảo nghiệm nơi sự hiện diện của vùng Fc có thể gây ra vấn đề. Trong mô như hạch bạch huyết hoặc lá lách, hoặc trong các chế phẩm máu ngoại vi, các tế bào có thụ thể Fc (đại thực bào, bạch cầu đơn nhân, tế bào lympho B, và các tế bào giết tự nhiên) có mặt mà có thể ràng buộc các vùng Fc của kháng thể còn nguyên vẹn, gây nhuộm nền trong khu vực không chứa các kháng nguyên mục tiêu. Sử dụng F (ab ') 2 hoặc mảnh Fab đảm bảo rằng các kháng thể được liên kết với các kháng nguyên và không thụ thể Fc. Các mảnh vỡ này cũng có thể được mong muốn để nhuộm các chế tế bào trong sự hiện diện của huyết tương, bởi vì họ không thể để ràng buộc bổ sung, có thể Lyse các tế bào. F (ab ') 2, và đến một mức độ lớn hơn Fab, mảnh cho phép nhiều địa hóa chính xác của các kháng nguyên mục tiêu, ví dụ, trong mô nhuộm cho kính hiển vi điện tử. Các hóa trị của F (ab ') 2 mảnh cho phép nó để kháng nguyên chéo liên kết, cho phép sử dụng cho xét nghiệm kết tủa, tập hợp tế bào thông qua các kháng nguyên bề mặt, hoặc xét nghiệm rosetting.[38]

Gen[sửa | sửa mã nguồn]

Ba gen mã hóa enzyme sau pepsinogen, men pepsinogen nhân A:

Một gen nhân thứ tư mã hóa gastricsin còn được gọi là pepsinogen C:

Tham khảo[sửa | sửa mã nguồn]

  1. ^ PDB: 1PSO​; Fujinaga M, Chernaia MM, Tarasova NI, Mosimann SC, James MN (tháng 5 năm 1995). “Crystal structure of human pepsin and its complex with pepstatin”. Protein Sci. 4 (5): 960–72. PMC 2143119. PMID 7663352. doi:10.1002/pro.5560040516. 
  2. ^ Dunn BM (tháng 11 năm 2001). “Overview of pepsin-like aspartic peptidases”. Current Protocols in Protein Science / Editorial Board, John E. Coligan... [Et Al.] Chapter 21: Unit 21.3. ISBN 0471140864. PMID 18429164. doi:10.1002/0471140864.ps2103s25. 
  3. ^ “Enzyme entry 3.4.23.1”. Truy cập ngày 14 tháng 12 năm 2008. 
  4. ^ Florkin M (tháng 3 năm 1957). “[Discovery of pepsin by Theodor Schwann]”. Revue Médicale De Liège (bằng tiếng Pháp) 12 (5): 139–44. PMID 13432398. 
  5. ^ Asimov I (1980). “page 95”. A short history of biology. Westport, Conn: Greenwood Press. ISBN 0-313-22583-4. 
  6. ^ Harper, Douglas. “pepsin”. Online Etymology Dictionary. 
  7. ^ πέψις, πέπτειν. Liddell, Henry George; Scott, Robert; A Greek–English Lexicon at the Perseus Project.
  8. ^ Fruton JS (tháng 6 năm 2002). “A history of pepsin and related enzymes”. The Quarterly Review of Biology 77 (2): 127–47. JSTOR 3071644. PMID 12089768. doi:10.1086/340729. 
  9. ^ Northrop JH (tháng 5 năm 1929). “Crystalline pepsin”. Science 69 (1796): 580. Bibcode:1929Sci....69..580N. PMID 17758437. doi:10.1126/science.69.1796.580. 
  10. ^ “Effects of pH”. Truy cập ngày 29 tháng 4 năm 2010. 
  11. ^ “Information on EC 3.4.23.1 - pepsin A”. Brenda-enzymes. Truy cập ngày 14 tháng 12 năm 2008. 
  12. ^ a ă Cox M, Nelson DR, Lehninger AL (2008). Lehninger principles of biochemistry. San Francisco: W.H. Freeman. ISBN 0-7167-7108-X. 
  13. ^ a ă â Johnston N, Dettmar PW, Bishwokarma B, Lively MO, Koufman JA (tháng 6 năm 2007). “Activity/stability of human pepsin: implications for reflux attributed laryngeal disease”. The Laryngoscope 117 (6): 1036–9. PMID 17417109. doi:10.1097/MLG.0b013e31804154c3. 
  14. ^ a ă â Johnston N, Knight J, Dettmar PW, Lively MO, Koufman J (tháng 12 năm 2004). “Pepsin and carbonic anhydrase isoenzyme III as diagnostic markers for laryngopharyngeal reflux disease”. The Laryngoscope 114 (12): 2129–34. PMID 15564833. doi:10.1097/01.mlg.0000149445.07146.03. 
  15. ^ a ă â Johnston N, Dettmar PW, Lively MO, Postma GN, Belafsky PC, Birchall M, Koufman JA (tháng 1 năm 2006). “Effect of pepsin on laryngeal stress protein (Sep70, Sep53, and Hsp70) response: role in laryngopharyngeal reflux disease”. The Annals of Otology, Rhinology, and Laryngology 115 (1): 47–58. PMID 16466100. doi:10.1177/000348940611500108. 
  16. ^ Goldberg HI, Dodds WJ, Gee S, Montgomery C, Zboralske FF (tháng 2 năm 1969). “Role of acid and pepsin in acute experimental esophagitis”. Gastroenterology 56 (2): 223–30. PMID 4884956. 
  17. ^ Lillemoe KD, Johnson LF, Harmon JW (tháng 8 năm 1982). “Role of the components of the gastroduodenal contents in experimental acid esophagitis”. Surgery 92 (2): 276–84. PMID 6808683. 
  18. ^ Tamhankar AP, Peters JH, Portale G, Hsieh CC, Hagen JA, Bremner CG, DeMeester TR (tháng 11 năm 2004). “Omeprazole does not reduce gastroesophageal reflux: new insights using multichannel intraluminal impedance technology”. Journal of Gastrointestinal Surgery 8 (7): 890–7; discussion 897–8. PMID 15531244. doi:10.1016/j.gassur.2004.08.001. 
  19. ^ Kawamura O, Aslam M, Rittmann T, Hofmann C, Shaker R (tháng 6 năm 2004). “Physical and pH properties of gastroesophagopharyngeal refluxate: a 24-hour simultaneous ambulatory impedance and pH monitoring study”. The American Journal of Gastroenterology 99 (6): 1000–10. PMID 15180717. doi:10.1111/j.1572-0241.2004.30349.x. 
  20. ^ Oelschlager BK, Quiroga E, Isch JA, et al. Gastroesophageal and pharyngeal reflux detection using impedance and 24-hour pH monitoring in asymptomatic subjects: defining the normal environment. J Gastrointest Surg 2006;10:54–62.
  21. ^ Mainie I, Tutuian R, Shay S, Vela M, Zhang X, Sifrim D, Castell DO (tháng 10 năm 2006). “Acid and non-acid reflux in patients with persistent symptoms despite acid suppressive therapy: a multicentre study using combined ambulatory impedance-pH monitoring”. Gut 55 (10): 1398–402. PMC 1856433. PMID 16556669. doi:10.1136/gut.2005.087668. 
  22. ^ Johnston N, Wells CW, Blumin JH, Toohill RJ, Merati AL (tháng 12 năm 2007). “Receptor-mediated uptake of pepsin by laryngeal epithelial cells”. The Annals of Otology, Rhinology, and Laryngology 116 (12): 934–8. PMID 18217514. doi:10.1177/000348940711601211. 
  23. ^ Johnston N, Wells CW, Samuels TL, Blumin JH (tháng 8 năm 2010). “Rationale for targeting pepsin in the treatment of reflux disease”. The Annals of Otology, Rhinology, and Laryngology 119 (8): 547–58. PMID 20860281. doi:10.1177/000348941011900808. 
  24. ^ Samuels TL, Johnston N (tháng 11 năm 2009). “Pepsin as a causal agent of inflammation during nonacidic reflux”. Otolaryngology--Head and Neck Surgery 141 (5): 559–63. PMID 19861190. doi:10.1016/j.otohns.2009.08.022. 
  25. ^ Balkwill F, Mantovani A (tháng 2 năm 2001). “Inflammation and cancer: back to Virchow?”. Lancet 357 (9255): 539–45. PMID 11229684. doi:10.1016/S0140-6736(00)04046-0. 
  26. ^ Adams J, Heintz P, Gross N, Andersen P, Everts E, Wax M, Cohen J (tháng 3 năm 2000). “Acid/pepsin promotion of carcinogenesis in the hamster cheek pouch”. Archives of Otolaryngology--Head & Neck Surgery 126 (3): 405–9. PMID 10722017. doi:10.1001/archotol.126.3.405. 
  27. ^ Knight J, Lively MO, Johnston N, Dettmar PW, Koufman JA (tháng 8 năm 2005). “Sensitive pepsin immunoassay for detection of laryngopharyngeal reflux”. The Laryngoscope 115 (8): 1473–8. PMID 16094128. doi:10.1097/01.mlg.0000172043.51871.d9. 
  28. ^ Samuels TL, Johnston N (tháng 3 năm 2010). “Pepsin as a marker of extraesophageal reflux”. The Annals of Otology, Rhinology, and Laryngology 119 (3): 203–8. PMID 20392035. 
  29. ^ Bardhan KD, Strugala V, Dettmar PW (2012). “Reflux revisited: advancing the role of pepsin”. International Journal of Otolaryngology 2012: 1. PMC 3216344. PMID 22242022. doi:10.1155/2012/646901. 
  30. ^ Marciniszyn J, Hartsuck JA, Tang J (1977). “Pepstatin inhibition mechanism”. Advances in Experimental Medicine and Biology 95: 199–210. PMID 339690. doi:10.1007/978-1-4757-0719-9_12. 
  31. ^ Husain SS, Ferguson JB, Fruton JS (tháng 11 năm 1971). “Bifunctional inhibitors of pepsin”. Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America 68 (11): 2765–8. Bibcode:1971PNAS...68.2765H. PMC 389520. PMID 4941985. doi:10.1073/pnas.68.11.2765. 
  32. ^ Northrop HJ (1932). “The story of the isolation of crystalline pepsin and trypsin”. The Scientific Monthly 35 (4): 333–340. Bibcode:1932SciMo..35..333N. 
  33. ^ Greenwell P, Knowles JR, Sharp H (tháng 6 năm 1969). “The inhibition of pepsin-catalysed reactions by products and product analogues. Kinetic evidence for ordered release of products”. The Biochemical Journal 113 (2): 363–8. PMC 1184643. PMID 4897199. 
  34. ^ Kun LY (2006). Microbial Biotechnology: Principles And Applications. World Scientific Publishing Company. ISBN 981-256-677-5. 
  35. ^ Đăng ký phát minh US 2259543, "Fortified Cereal", trao vào [[{{{gdate}}}]], chủ sở hữu Cream of Wheat Corporation 
  36. ^ Smith ER (tháng 9 năm 1933). “Gelatinase and the gates-gilman-cowgill method of pepsin estimation”. The Journal of General Physiology 17 (1): 35–40. PMC 2141270. PMID 19872760. doi:10.1085/jgp.17.1.35. 
  37. ^ Lane DS, Harlow E (1988). Antibodies: a laboratory manual. Cold Spring Harbor, N.Y: Cold Spring Harbor Laboratory. tr. A2926. ISBN 0-87969-314-2. 
  38. ^ “Enzyme Explorer- Pepsin”. Sigma-Aldrich.